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06 \ 其它

菌类

1. TMT

1.1. 3000g - 5000g 离心 5 - 15min，去上清；

1.2. PBS 洗涤沉淀三次，后转移到冻存管中（50mg-2g/sample）；

1.3. 液氮速冻后菌体-80℃保存。

2. Label free

2.1. 3000g - 5000g 离心 5 - 15min，去上清；

2.2. PBS 洗涤沉淀三次，后转移到冻存管中（25mg-1g/sample）；

2.3. 液氮速冻后菌体-80℃保存。

3. 磷酸化蛋白组学

3.1. 3000g - 5000g 离心 5 - 15min，去上清；

3.2. PBS 洗涤沉淀三次，后转移到冻存管中（100mg-4g/sample）；

3.3. 液氮速冻后菌体-80℃保存。

3. 糖基化蛋白组学

3.1. 3000g - 5000g 离心 5 - 15min，去上清；

3.2. PBS 洗涤沉淀三次，后转移到冻存管中（259mg-10g/sample）；

3.3. 液氮速冻后菌体-80℃保存。

1. 菌体

1.1. 取混匀后的细菌培养液一定体积（1*10⁷ 菌体/sample）；

1.2. 4℃，1000g离心 10min，弃上清留沉淀（低速离心的目的是再保证菌体不破碎的 前提下将菌体沉淀下来，可以根据实验室具体情况调整离心力大小不时长，下同）；

1.3. 淬灭：将盛有菌体沉淀的离心管浸泡在液氮中 ≥ 10min；

1.4. 漂洗：将淬灭好的菌体在冰上解冻，然后用PBS进行漂洗（1000g，4℃，离心） 一次；

1.5. 去除上清，-80℃冰箱保存。

2. 培养液

2.1. 进行菌体计数，计算出 1*10⁷ 个菌体所需要的体积（该体积为 1 体积，也就是说 1 体积菌体悬浮液中含有 1*10⁷ 个菌体）；

2.2. 将菌体培养液手摇轻轻混匀后，取1体积菌体悬浮液，4℃，1000g，离心1min（沉 淀菌体，离心力不宜过大，防止菌体破碎，可以根据实际情况调整）；

2.3. 取上清 500μL 至 1.5mL 离心管中（最少不低于 100μL/sample）；

2.4. 然后放到液氮中浸泡 ≥ 10min 速冻；

2.5. 放入-80℃冰箱保存。