
Exosome Samples
02 \ 外泌体样本
转录组
一、RNA-seq
- 1、 样本需要为人/鼠来源样本,细胞上清需要为人/鼠源细胞上清。
- 2、 血液样本需为新鲜血样,血浆优于血清;选用血浆时,抗凝素避免使用肝素。
- 血清分离方法:
- 1) 血液收集在离心管中 37℃(或室温)静置 1h 进行凝固分层;
- 2)1300g 室温离心取上清转至干净的离心管中;
- 3)16000g 4℃ 离心 10 分钟,取上清分装到冻存管中;
- 血浆分离方法:
- 1) 采集外周血,迅速转入抗凝管中,涡旋或用移液器 Tip 混匀;
- 2)在 1 小时(室温条件下)或 2 小时(4℃条件下)内进行以下操作:4℃,820g 离心 10分钟;
- 3)吸取上清转至洁净的离心管中,16,000g, 4℃,离心 10 分钟,小心吸取上清到冻存管中(0.1-1ml/sample);
- 每个样本提供5ml,样本采集后需-80℃保存,干冰运输(短距离可冰盒运输),避免反复冻融。
- 3、 提供胸腹水样本抽提外泌体,需低速离心去除细胞以及细胞碎片等。每个样本提供30-50ml,样本采集后需-80℃保存,干冰运输(短距离可冰盒运输),避免反复冻融。
- 4、 提供细胞上清抽提外泌体,使用含血清的培养基前,需要去除血清中外泌体或使用无外泌体血清。每个样本提供200ml,样本收集后需-80℃保存,干冰运输(短距离可冰盒运输),避免反复冻融。
- 5、 盛放液体样本的管子应使用硅化的取样管,减少管壁对外泌体的吸附。