Cells

02 \ 细胞收集指南

蛋白组

提供4E7细胞

收样标准（贴壁细胞）

1) 弃掉培养液，并将培养皿倒置于吸水纸上吸干培养液

2) 加入4℃预冷的PBS，平放轻轻摇动1分钟洗涤细胞，然后弃去PBS。 重复以上操作两次以洗去培养液。

3) 将培养皿置于冰上。向培养皿内加入4℃预冷的PBS。用干净的细胞刮棒将细胞刮于培养皿的一侧（动作要快），冰上斜置培养皿，使得缓冲液流向一侧。移液管吸取溶解产物至预冷的离心管内。1000g，10分钟离心，去掉上清。

4) 液氮速冻，-80℃保存，干冰送样

收样标准（悬浮细胞）

1) 1000g离心10分钟收获细胞，弃上清。

2) 用预冷的PBS小心洗涤片状沉淀物2次，置于冰上，去上清。

3) 液氮速冻，-80℃保存，干冰寄送

悬浮细胞：5-10×10^6

1. 400g-1000g 离心10 分钟收获细胞，弃上清。

2. 用预冷的PBS 小心洗涤片状沉淀物2 次，置于冰上，去上清。

3. 液氮速冻，-80℃保存。

强烈建议客户本地裂解细胞，具体方法：参见上述步骤将细胞用PBS 洗涤之后，弃净PBS，根据后续不同的实验方法要求加入相应裂解液重悬片状沉淀物，使得每ml 内含有5 × 10^7 细胞，-80℃保存。

贴壁细胞：5-10×10^6

1. 弃掉培养液，并将培养皿倒置于吸水纸上吸干培养液

2. 加入4℃预冷的PBS，平放轻轻摇动1 分钟洗涤细胞，然后弃去PBS。 重复以上操作两次以洗去培养液。

3. 将培养皿置于冰上。向培养皿内加入4℃预冷的PBS。用干净的细胞刮棒将细胞刮于培养皿的一侧（动作要快），冰上斜置培养皿，使得缓冲液流向一侧。移液管吸取溶解产物至预冷的离心管内。离心去上清。

4. 液氮速冻，-80℃保存。

强烈建议客户本地裂解细胞，具体方法：参见上述步

处理方法同TMT，所需量为TMT的1/2

处理方法同TMT，所需量为TMT的1/2

处理方法同TMT，所需量为TMT的1/2

处理方法同TMT，所需量为TMT的1/2

处理方法同TMT，所需量为TMT的2倍

处理方法同TMT，所需量为TMT的2倍

处理方法同TMT，所需量为TMT的10倍

处理方法同TMT，所需量为TMT的10倍