Blood
03 \ 血液收集指南
血清
一、基因组
- 1. 甲基化测序(RRBS、BSAS）
- 1.1. 血液收集在离心管中37℃（或室温）静置 1h 进行凝固分层；
- 1.2. 1300g 室温离心取上清转至干净的离心管中；
- 1.3. 16000g ，4℃离心 10 分钟，取上清分装到冻存管中（≥ 2 mL/sample）；
- 1.4. 液氮速冻后-80℃冰箱保存。
- 2. 全基因组测序
- 2.1. 血液收集在离心管中 37℃（或室温）静置 1h 进行凝固分层；
- 2.2. 1300g 室温离心取上清转至干净的离心管中；
- 2.3. 16000g ，4℃离心 10 分钟，取上清分装到冻存管中（≥ 2 mL/sample）；
- 2.4. 液氮速冻后-80℃冰箱保存。
- 3. 全外显子组测序
- 3.1. 血液收集在离心管中 37℃（或室温）静置 1h 进行凝固分层；
- 3.2. 1300g 室温离心取上清转至干净的离心管中；
- 3.3. 16000g ，4℃离心 10 分钟，取上清分装到冻存管中（≥ 2 mL/sample）；
- 3.4. 液氮速冻后-80℃冰箱保存。
二、转录组
- 1. 基因芯片
- 1.1. 血液收集在离心管中 37℃（或室温）静置 1h 进行凝固分层；
- 1.2. 1300g 室温离心取上清转至干净的离心管中；
- 1.3. 16000g 4℃ 离心 10 分钟，取上清分装到冻存管中；
- 1.4. 液氮速冻后-80℃冰箱保存。
三、蛋白组
- 1. TMT
- 1.1. 血液收集在离心管中 37℃（或室温）静置 1h 进行凝固分层；
- 1.2. 1300g 室温离心取上清转至干净的离心管中；
- 1.3. 10000g 4℃ 离心 10 分钟，取上清分装到冻存管中（0.1-1ml/sample）； TMT 0.1-1ml/sample，Label free 样本量酌情减半，磷酸化样本量×2，糖 基化样本量×5）；
- 1.4. 液氮速冻后-80℃冰箱保存。
- 2. Label free
- 2.1. 血液收集在离心管中 37℃（或室温）静置 1h 进行凝固分层；
- 2.2. 1300g 室温离心取上清转至干净的离心管中；
- 2.3. 10000g 4℃ 离心 10 分钟，取上清分装到冻存管中（50-500ul/sample）；
- 2.4. 液氮速冻后-80℃冰箱保存。
- 3. 磷酸化蛋白组学
- 3.1. 血液收集在离心管中 37℃（或室温）静置 1h 进行凝固分层；
- 3.2. 1300g 室温离心取上清转至干净的离心管中；
- 3.3. 10000g 4℃ 离心 10 分钟，取上清分装到冻存管中（0.2-2ml/sample）；
- 3.4. 液氮速冻后-80℃冰箱保存。
- 4. 糖基化蛋白组学
- 4.1. 血液收集在离心管中 37℃（或室温）静置 1h 进行凝固分层；
- 4.2. 1300g 室温离心取上清转至干净的离心管中；
- 4.3. 10000g 4℃ 离心 10 分钟，取上清分装到冻存管中（0.5-5ml/sample）；
- 4.4. 液氮速冻后-80℃冰箱保存。
四、代谢组
- 1. 血液收集在离心管中 37℃（或室温）静置 1h 进行凝固分层；
- 2. 1300g 室温离心取上清转至干净的离心管中；
- 3. 10000g 4℃ 离心 10分钟，取上清分装到冻存管中；
- （MR 实验 500ul/sample，GC-MS，LC-MS 实验 200ul/sample）
- 注意点：
- 1）取血时如用酒精消毒，请擦干擦拭部位，待酒精完全挥发后再取样；
- 2）取血时如用麻醉剂，建议用异氟醚，防止在 NMR 血清谱图中出现干扰峰；
- 3）血清参考产率：30% ~ 50%（例如：1mL 全血大约能得 0.3 ~ 0.5mL 血清）；
- 4）采全血时如使用真空采血管，请务必使用无预加抗凝剂的凝血管。
五、蛋白芯片
- 血液收集在离心管中37℃（或室温）静置1h进行凝固分层。然后3000rpm室温离心取上清转至干净的离心管中。再12000rpm 4℃离心10分钟，取上清分装到1.5mL离心管中，每管0.2ml，-80度冻存。足量干冰寄送。
- 注意事项：
- 1）取血时如用酒精消毒，请擦干擦拭部位，待酒精完全挥发后再取样。
- 2）血清参考产率：30%~50%（例如：1mL全血大约能得0.3~0.5mL血清）
- 3）采全血时如使用真空采血管，请务必使用无预加抗凝剂的凝血管。
- 4）强烈推荐尽量多的收集样本并分装冻存（这样可以用来做很多实验，且避免反复冻融）