腺病毒(Adenovirus)是一种线性双链DNA无包膜病毒,对分裂期细胞和非分裂期细胞均具有感染能力,且具有嗜上皮细胞性。重组腺病毒载体是以腺病毒为基础发展起来的工具病毒载体,它可通过受体介导的内吞作用进入细胞内,但腺病毒基因组不整合进入宿主细胞基因组中。腺病毒作为一种常用的基因操作工具,在心血管领域、肝脏、肌肉、肺、肿瘤及其他领域广泛应用。
腺病毒与其他病毒工具比较,具有以下优势:
a.是研究原代非增殖细胞基因表达的最佳系统:腺病毒感染细胞后,1-2天即可表达,是研究原代非增殖细胞基因表达的最佳系统;
b.滴度高:腺病毒系统在转有E1基因的HEK293细胞中可进行自我复制,可产生滴度为1010到1011PFU/mL的病毒;
c.载体容量大:可容纳不超过5kb的片段;
d.不整合到染色体中,无插入致突变性:腺病毒除卵细胞以外,几乎在所有已知细胞中都不整合到染色体中,因此避免了因整合而引发的潜在的基因突变和随机效应。
病毒表达系统 |
腺病毒 (Adenovirus) |
慢病毒 (Lentivirus) |
腺相关病毒 (Adeno-Associate virus) |
病毒基因组 | 双链DNA病毒 | RNA病毒 | 单链DNA病毒 |
复制 | 条件复制 | 不可复制 | 条件复制 |
滴度 | 最高可达1012pfu/ml | 最高可达109TU/ml | 最高可达1012-13v.g/ml |
感染细胞类型 | 感染分裂和不分裂细胞 | 感染分裂和不分裂细胞 | 感染分裂不旺盛的细胞 |
表达丰度 | 高水平表达 | 中到高水平表达 | 高水平表达 |
表达时间 | 快(1-2天) | 慢(2-4天) | 1-2周 |
持续表达时间 |
病毒基因组游离于宿主基因组外, 瞬时表达外源基因 |
病毒基因组整台于宿主基因组, 长时间、稳定表达外源基因 |
病毒基因组游离于宿主基因组外, 在分裂旺盛的细胞中可长时间表达 |
克隆容量 | 适合表达小于5kb的外源片段 | 适合表达小于4kb的外源片段 | 适合表达小于2.8kb的外源片段 |
免疫原性 | 较高免疫原性 | 低免疫原性 | 低免疫原性 |
安全性 | 可能会引起一些咳嗽流涕 |
暂无发现致病性, 已被用于CAR-T治疗作用于人体 |
暂无发现致病性, 已通过欧盟和FDA许可, 用作基因治疗药物的载体 |
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科研-细胞级 | 科研-动物级 |
产品特点 | 可快速获得的纯病毒 |
纯度和滴度较高,滴度达1E+10PFU/m以上,可用于动物实验 |
适用范围 | 适用于永生化细胞系,或作为病毒扩增毒种 |
适用于在难以转染的细胞中表达特定基因, 也可用于动物实验 |
质量标准 |
滴度≥1E+9 PFU/ml 微生物检测阴性 |
滴度≥1E+10 PFU/ml 复制性腺病毒水平<1 RCA/3.0×10^10VP 病毒感染滴度/病毒颗粒数(IUVP) > 3.3% 质粒DNA残留≤4E+8 copy/ml 宿主DNA残留≤10 μg/ml 微生物检测阴性 |
吉凯提供完善的腺病毒产品体系,用于操作编码基因和非编码基因,如lncRNA、microRNA、circRNA。以下腺病毒载体可供您选择,点击查看载体图谱>>
调控方式 | 载体编号 | 元件顺序 | 原核抗性 | 真核抗性 |
荧光标记 启动子 |
RNAi/过表达 启动子 |
荧光标记 |
过表达 | GV345 | CMV-MCS-3FLAG-SV40-Cherry | Ampicillin | 无 | SV40 | CMV | Cherry |
GV314 | CMV-MCS-3FLAG-SV40-EGFP | Ampicillin | 无 | SV40 | CMV | GFP | |
干扰 | GV119 | hU6-MCS-CMV-EGFP | Ampicillin | 无 | CMV | U6 | GFP |
miRNA-up | GV202 | hU6-MCS-CMV-EGFP | Ampicillin | 无 | CMV | U6 | GFP |
GV317 | CMV-MCS-SV40-EGFP | Ampicillin | 无 | SV40 | CMV | GFP | |
miRNA-down | GV201 | hU6-MCS-CMV-EGFP | Ampicillin | 无 | CMV | U6 | GFP |
1.细胞感染
腺病毒可有效感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。
2.在体注射
2.1神经系统
代表文献 吉凯客户文章Brain Behavior and Immunity,2017.(IF:19.227)
文献来源:Zhong J, Jiang L, Huang Z, et al. The long non-coding RNA Neat1 is an important mediator of the therapeutic effect of bexarotene on traumatic brain injury in mice[J]. Brain Behavior and Immunity, 2017, 65: 183-194.
2.2心脏
代表文献 吉凯客户文章Redox Biology, 2023, 60: 102606.
文献来源:Zhong Y, Tang K, Nattel S, et al. Myosin light-chain 4 gene-transfer attenuates atrial fibrosis while correcting autophagic flux dysregulation[J]. Redox Biology, 2023, 60: 102606.
2.3肝脏
代表文献 吉凯客户文章Journal of advanced research, 2022, S2090-1232(22): 00189-8.
文献来源:Liao Q, Liu Z, Zhu C, et al. Rapid generation of a mouse model for evaluating on-target normal tissue toxicity of human CAR-T cells using replication-defective recombinant adenovirus[J]. Journal of Advanced Research, 2022, S2090-1232(22): 00189-8.
2.4眼
代表文献 吉凯客户文章Advanced Science, 2022, 9(21): 2105365.
文献来源:Ran J, Zhang Y, Zhang S, et al. Targeting the HDAC6-Cilium Axis Ameliorates the Pathological Changes Associated with Retinopathy of Prematurity[J]. Advanced Science, 2022, 9(21): e2105365.
2.5胰腺
代表文献 Molecular Therapy ,2011,19(1):60-66.(IF: 12.91)
文献来源:Tang M M, Zhu Q E, Fan W Z, et al. Intra-arterial targeted islet-specific expression of Sirt1 protects β cells from streptozotocin-induced apoptosis in mice[J]. Molecular Therapy, 2011, 19(1): 60-6.
1. Li Y, Li Z, Zhang C, et al. Cardiac Fibroblast-Specific Activating Transcription Factor 3 Protects Against Heart Failure by Suppressing MAP2K3-p38 Signaling[J]. Circulation, 2017, 135(21): 2041-2057. (IF= 39.918).吉凯产品:过表达腺病毒 研究领域:心力衰竭 首都医科大学附属安贞医院
2. He J, Bao Q, Zhang Y, et al. Yes-Associated Protein Promotes Angiogenesis via Signal Transducer and Activator of Transcription 3 in Endothelial Cells[J]. Circulation Research, 2018, 122(4): 591-605. (IF= 23.213).吉凯产品:过表达腺病毒 研究领域:血管生成 天津医科大学
3. Xiao C, Wang K, Xu Y, et al. Transplanted Mesenchymal Stem Cells Reduce Autophagic Flux in Infarcted Hearts via the Exosomal Transfer of miR-125b[J]. Circulation Research, 2018, 123(5): 564-578. (IF= 23.213).吉凯产品:过表达腺病毒 研究领域:心肌梗死 浙江大学第二附属医院
4. Li Y, Yin A, Sun X, et al. Deficiency of tumor suppressor NDRG2 leads to attention deficit and hyperactive behavior[J]. The Journal of Clinical Investigation, 2017, 127(12): 4270-4284. (IF= 19.456).吉凯产品:过表达腺病毒 研究领域:多动症 空军军医大学(第四军医大学)附属西京医院
5.Jiao J, Zhang R, Li Z, et al. Nuclear Smad6 promotes gliomagenesis by negatively regulating PIAS3-mediated STAT3 inhibition[J]. Nature Communication, 2018, 9(1): 2504. (IF= 12.353).吉凯产品:过表达腺病毒GV138和干扰慢病毒GV248研究领域:胶质瘤 南京医科大学无锡人民医院
6.Zhang Y, Ji H, Wang J,et al. Melatonin-mediated inhibition of Cav3.2 T-type Ca2+ channels induces sensory neuronal hypoexcitability through the novel protein kinase C-eta isoform[J]. Journal of Pineal Research, 2018, 64(4): e12476. (IF= 12.081).吉凯产品:干扰腺病毒 研究领域:神经 苏州大学
7.Yan J, Zhang Y, Yu H, et al. GPSM1 impairs metabolic homeostasis by controlling a pro-inflammatory pathway in macrophages[J]. Nature Communications, 2022, 13(1): 7260. (IF= 17.694).吉凯产品:RNAi腺病毒 研究领域:代谢炎症 上海交通大学医学院附属上海市第六人民医院
8.Xu X, Shi Y, Luan P, et al. The subcellular redistribution of NLRC5 promotes angiogenesis via interacting with STAT3 in endothelial cells[J]. Theranostics, 2021, 11(9): 4483-4501. (IF= 11.6).吉凯产品:过表达腺病毒 研究领域:肺 同济大学医学院上海市第十人民医院心内科
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