基于细胞成像(HCA)的细胞增殖检测 |
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实验目的 |
实验技术 |
周期(工作日) |
检测细胞增殖或药物抗增殖 |
利用HCA系统(如Celigo、IncucyteS3、CQ1等仪器)进行细胞计数或分析细胞汇合度,以检测细胞增殖情况 |
15-20 |
MTT/CCK8、CTG、CyQUANT细胞增殖检测 |
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实验目的 |
实验技术 |
周期(工作日) |
MTT/CCK8检测细胞增殖或药物抗增殖 |
被细胞线粒体中的琥珀脱氢酶还原生成的甲臜物数量与活细胞的数量成正比,用酶标仪在特定波长处测吸收值,以反映细胞活力 |
15-20 |
CellTiter-Glo (CTG) 检测细胞增殖或药物抗增殖 |
ATP含量与活细胞数正相关,向细胞中加入CTG试剂,用酶标仪测发光值,以反映细胞活力 |
15-20 |
CyQUANT检测细胞增殖或药物抗增殖 |
CyQUANT是基于一种细胞通透性DNA 结合染料以及一种遮蔽染料,遮蔽染料可以阻断死细胞或细胞膜受损细胞的染色,从而导致仅有健康细胞出现染色。向细胞中加入CyQUANT试剂,用酶标仪测荧光或HCA成像,以反映细胞增殖情况 |
15-20 |
基于细胞成像(HCA)的细胞划痕愈合实验 |
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实验目的 |
实验技术 |
周期(工作日) |
检测细胞转移能力 |
利用HCA系统(如Celigo)进行细胞划痕愈合观察和分析,以反映细胞转移能力 |
15-20 |
Transwell转移实验、侵袭实验 |
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实验目的 |
实验技术 |
周期(工作日) |
Transwell转移小室检测细胞转移能力 |
通过显微镜观察并计数细胞从Transwell转移小室(底层含有8 µm孔径大小的聚碳酸酯膜)转移至下室的数量,来反映细胞转移能力 |
15-20 |
Transwell侵袭小室检测细胞侵袭转移能力 |
通过显微镜观察并计数细胞从Transwell侵袭小室(底层含有8 µm孔径大小的聚碳酸酯膜,其上铺有Matrigel基质薄层)侵袭转移至下室的数量,来反映细胞侵袭转移能力 |
15-20 |
细胞周期检测(FACS) |
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实验目的 |
实验技术 |
周期(工作日) |
检测处于细胞周期各时相的细胞 |
通过FACS检测PI荧光强度直接反映细胞各时相的DNA分布状态,从而检测各时相细胞百分率 |
15-20 |
细胞凋亡检测(FACS) |
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实验目的 |
实验技术 |
周期(工作日) |
Annexin V&PI染色FACS检测细胞凋亡 |
将Annexin V 与PI 匹配使用对细胞进行染色标记,用FACS检测早期凋亡细胞、中晚期凋亡细胞和坏死细胞百分率 |
15-20 |
Caspase 3/7 Glo检测凋亡 |
通过Caspase 3/7 Glo试剂检测Caspase3/7活性,用酶标仪测发光值,发光值与Caspase3/7活性成正相关,从而依此判断细胞凋亡情况 |
15-20 |
2D平板克隆形成实验、3D成球实验 |
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实验目的 |
实验技术 |
周期(工作日) |
检测细胞平板克隆形成能力(2D克隆形成) |
待细胞在培养板形成单克隆后染色计数,通过计数克隆数量,可对单个细胞的增殖潜力做定量分析 |
15-20 |
检测细胞在低吸附培养板内成球能力(3D成球) |
待细胞在低吸附培养板内形成肿瘤球,用celigo进行扫板获取图像,分析3D肿瘤球体大小和形态,并对肿瘤球用CellTiter-Glo 3D进行活力检测 |
20-25 |
细胞杀伤LDH实验 |
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实验目的 |
实验技术 |
周期(工作日) |
检测细胞上清中LDH活性以判断细胞受损情况/杀伤细胞情况 |
乳酸脱氢酶(LDH)存在于正常细胞的胞质中,一旦细胞膜受损,LDH即被释放到细胞外;LDH检测试剂盒可检测细胞上清中LDH含量,用酶标仪在特定波长处测吸收值,以判断细胞受损情况。 |
15-20 |
DNA损伤实验(IF) |
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实验目的 |
实验技术 |
周期(工作日) |
检测细胞内γ-H2AX水平以判断细胞DNA损伤情况 |
利用免疫荧光检测DNA损伤后形成的磷酸化的H2AX Ser139产物(即γ-H2AX或γH2AX),以评估DNA的损伤。 |
15-20 |
备注:以上周期不包含实验材料准备及预实验所用周期。
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