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常见问题
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返回慢病毒浓缩纯化的方法有哪些?

慢病毒纯化工艺,依据其纯化原理主要分为超速离心、密度梯度离心、PEG离心、超滤、切向流、离子交换层析等方法。当前主要的慢病毒纯化均是由上述中的一种或几种方法组合在一起完成。

对于大部分的细胞感染以及普通的动物实验来说,我们推荐使用超速离心方法对慢病毒进行浓缩。超滤过程中留下的细胞碎片会导致细胞毒性,直接影响病毒的应用。



病毒上清/粗纯病毒

科研级慢病毒

科研+级慢病毒

临床级慢病毒

纯化方法

无/超滤

超速离心

切向流+超速离心

切向流+蛋白纯化+离心

纯度

极低

较高

极高

总DNA残留

较高

≤10μg/ml

≤1μg/ml

≤100pg/ml

总蛋白残留

较高

≤200μg/ml

≤100μg/ml

≤80μg/ml

BSA残留

较高

≤10μg/ml

≤1μg/ml

≤200ng/ml

滴度

滴度较低且不稳定

≥1E+8TU/ml

≥1E+9TU/ml

≥2E+8TU/ml

工艺复杂度

操作简单

操作较简单

操作比较复杂

操作复杂,严格,耗时长

应用方向

易感染的永生化细胞系,不适合原代细胞或干细胞等敏感细胞

绝大多数永生化的细胞系,原代细胞、干细胞、动物实验

对外源刺激极度敏感的细胞及动物实验

临床前及临床研究