1.快：尽快洗净或处理，处理后尽快冷冻。细胞可以直接用Trizol裂解后冷冻，组织洗净后、分小块后直接冷冻。（RNA Later®有帮助，注意组织要薄或小）

2.低温：先浸入液氮，数小时后再放入-70或-80度超低温冰箱更佳。超低温冰箱可以保存数月至一年，-20度不宜久存

3.避免温度波动：一台经常开关门，温度上下波动的-80度冰箱，可能还不如一台稳定在-40度的冰箱。

4.其他：推荐进口冻存管，标签冷冻后容易破碎，不如自己记号笔标记。

常规建议：

1.均一的样本：如细胞系，处理vs不处理，各3～4/组

2.较均一的样本：如成系的动物，处理vs不处理，各5～8/组

3.不均一的成对样本：如多例病人，同一人的癌和癌旁，～20/组

4.不均一的不成对样本：如多例病人组织vs正常人组织。～40/组

组织：根据实验目的选择最合适的组织mRNA丰富、完整，最能代表难获取

注意：待研组织的占比

细胞：培养或分离的细胞处理简单，代表性略弱

血液、体液：血液、体液中游离的mRNA极少--不够量，易降解—不完整，不具有代表性

分离细胞——注意量

一般需要5E+6~5E+7 cells，或0.5*0.5*0.5 cm组织；0.5 ~2μg总RNA