反映细胞增殖情况;通常连续检测5天,获得细胞增殖曲线;检测细胞增殖最经济常用的方法,MTT只适用于贴壁细胞,MTS/CCK8可用于悬浮细胞。
因还原生成的甲臜物数量与活细胞的数量成正比,MTT、MTS、CCK-8均可用于细胞增殖的检测,目前被广泛应用于抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。
为研究某基因是否是某肿瘤细胞增殖相关的关键基因,可将目的基因shRNA慢病毒感染靶细胞,使靶细胞内源表达的目的基因表达下调,随后用MTT进行检测,观察目的基因表达下调后的细胞与对照细胞相比细胞增殖的变化,从而推断结论。
MTT 实验结果图
用待研基因shRNA慢病毒感染A375细胞,3天后收集细胞,按2000/孔的细胞数量接种细胞至96孔板,第二天待细胞贴壁后,开始进行MTT检测,连续检测5天,获得细胞增殖曲线。结果显示,shRNA下调目的基因表达后,细胞增殖显著减缓,表明待研基因与A375细胞增殖显著相关。