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基因研究中常需要通过上调靶基因的表达来观察表型变化。过表达（Over-Expression，OE）是上调基因表达最常用的方法，其基本原理是将目的基因的编码区（coding sequence，CDS）构建到质粒或病毒载体中，导入细胞内使基因的表达量增加。根据用途，载体主要分为克隆载体、原核表达载体、真核表达载体、慢病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、 逆转录病毒载体等。
过表达如何选择合适的载体呢？
首先我们需要考虑这几个方面:
1. 工具载体的表达时间与实验观察时间是否相符;
2. 工具载体可以容纳的片段大小与目的基因大小是否契合;
3. 工具载体对目的细胞、在体组织的转导是否足够高效。
|
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质粒 | 慢病毒 | 腺病毒 | 腺相关病毒 |
| 外源基因表达时间 |
24h开始表达 持续3-7天 |
2-4天开始表达 长时间稳定表达 |
1-2天开始表达 持续7-14天 |
7-14开始表达 细胞分裂不旺盛部位可长时间表达 |
| 插入片段大小 | < 5-8kb | < 4kb | < 5-8kb |
<2.8kb (包括必须的启动 子以及荧光或者标签元件) |
| 稳定细胞株筛选 | 可以，但较难操作 |
可以，外源基因整合于 主基因组，筛选简单 |
不可以，瞬时表达外源 基因传代后效果减弱 |
不可以 |
| 细胞实验 |
细胞系，部分细胞 转染效率较低 |
首选， 广谱，感染效率高 |
广谱，感染效率高， 适合原代非增殖细胞感染 |
不适合细胞实验 |
| 动物实验 | 不适合 |
适合， 根据观察时间 和注射部位选择 |
较适合(免疫原性高)， 根据观察时间和注射部位选择 |
首选， 根据观察时间和注射部位选择 |
| 滴度 | 无 | 最高可达109TU/ml | 高达1012pfu/ml | 高达1012-13v.g/ml |
其次，我们需要了解载体中的每一个元件代表什么。实际应用中，可根据实验目的来挑选合适的载体元件。下面是载体图谱上常见元件介绍：如启动子、荧光标签、抗性、多克隆酶切位点MCS等。
吉凯提供过表达质粒、慢病毒、腺病毒、腺相关病毒AAV等产品。请点击这里查询与购买>>
| 类别 | 产品名称 | 简介 | 产品规格 |
| 质粒 | cDNA克隆(现货) | 提供无错义、插入、缺失、颠倒、移码突变的CDS模版序列 | 10ug |
| 过表达质粒 | 用于过表达编码基因/incRNA | 10ug (含等量对照) | |
| 慢病毒 | 过表达慢病毒(现货) | 用于过表达编码基因/IncRNA |
5E+7TU/1E+8TU (含等量对照) |
| 过表达慢病毒 | 用于过表达编码基因/IncRNA | 1E+8TU (含等量对照) | |
| 过表达慢病毒(Tet-on ) | Tet on诱导过表达慢病毒 | 1E+8TU (含等量对照) | |
| 腺病毒 | 过表达腺病毒(现货) | 用于过表达编码基因/IncRNA | 2E+10PFU (含等量对照) |
| 过表达腺病毒 | 用于过表达编码基因/IncRNA | 2E+10PFU(含等量对照) | |
| 腺相关病毒 | 工具腺相关病毒(现货) |
光遗传、化学遗传、钙指示剂、 荧光示踪、重组酶等108种现货AAV |
1E+12v.g.-1E+13v.g |
| 过表达腺相关病毒 | 用于过表达编码基因/IncRNA | 1E+12v.g (含等量对照) |
吉凯提供用于过表达编码基因和非编码基因的质粒、慢病毒、腺病毒和腺相关病毒等多种载体。点击查看载体图谱>>
| 产品类别 | 载体编号 | 元件顺序 |
| 质粒过表达 | GV609 | MCS-firefly_ Luciferase |
| GV608 | MCS-firely_ Luciferase | |
| GV486 | CMV-left circular frame-MCS-right circular frame-EF1a-copGFP-SV40-Neomycin | |
| GV485 | CMV-left circular frame-MCS-right circular frame- SV40-neomycin | |
| GV272 | SV40-firefly_ Luciferase-MCS | |
| GV238 | MCS-firefly_ Luciferase | |
| GV230 | CMV-MCS-EGFP-SV40-Neomycin | |
| 慢病毒过表达 | GV365 | Ubi-MCS-3FL AG-CMV-EGFP |
| GV320 | Ubi-MCS-3FLAG-SV40-Cherry | |
| GV341 | Ubi-MCS-3FLAG-SV40-puromycin | |
| GV358 | Ubi-MCS-3FLAG-SV40-EGFP-IRES-puromycin | |
| GV492 | Ubi-MCS-3FLAG-CBh-gcGFP-IRES -puromycin | |
| 慢病毒过表达Tet-on | GV308 | TetlP-MCS-3FLAG-Ubi-TetR-IRES-Puromycin |
| 腺病毒过表达 | GV345 | CMV-MCS-3FLAG-SV40-Cherry |
| GV314 | CMV-MCS-3FLAG-SV40-EGFP | |
| 腺相关病毒过表达 | GV388 | CMV bGlobin-MCS-EGFP-3FLAG-WPRE-hGH polyA |
| GV389 | CMV bGlobin-MCS-mCherry-3FLAG-WPRE-hGH polyA | |
| GV410 | CMV bGlobin-MCS-3FLAG-T2A-EGFP | |
| GV411 | CMV-betaGlobin-MCS-3Flag-SV40 PolyA | |
| GV461 | CMV-betaGlobin-MCS-SV40 PolyA | |
| GV467 | CMV-betaGlobin-MCS-EGFP-3Flag-SV40 PolyA | |
| GV489 | CMV bGlobin-EGFP-MCS-WPRE-hGH polyA | |
| GV466 | hSyn promoter-MCS-EGFP-3FLAG-SV40 PolyA | |
| GV475 | hSyn promoter-MCS-mcherry-3FLAG-SV40 PolyA | |
| GV488 | gfaABC1D promoter-MCS-EGFP-WPRE-bGH PolyA |
1. Identification of genomic alterations in oesophageal squamous cell cancer. 2014, Nature (IF= 41.577). 吉凯产品：过表达质粒 研究领域：食管鳞状细胞癌 中国医学科学院
2. The Primate-Specific Gene TMEM14B Marks Outer Radial Glia Cells and Promotes Cortical Expansion and Folding. 2017, Cell stem cell (IF= 23.29). 吉凯产品：过表达质粒 研究领域：神经 中科院生物物理所
3. The metabolic ER stress sensor IRE1α suppresses alternative activation of macrophages and impairs energy expenditure in obesity. 2017, NATURE IMMUNOLOGY (IF=21.506). 吉凯产品：过表达慢病毒 研究领域：能量代谢 中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所
4. Cardiac Fibroblast-Specific Activating Transcription Factor 3 Protects Against Heart Failure by Suppressing MAP2K3-p38 Signaling. 2017, Circulation (IF= 18.881). 吉凯产品：过表达腺病毒 研究领域：心力衰竭 首都医科大学附属安贞医院
5. Yes-Associated Protein Promotes Angiogenesis Via Signal Transducer and Activator of Transcription 3 in Endothelial Cells. 2018, Circulation research (IF= 15.211). 吉凯产品：过表达腺病毒 研究领域：血管生成 天津医科大学
6. Transplanted Mesenchymal Stem Cells Reduce Autophagic Flux in Infarcted Hearts via the Exosomal Transfer of mir-125b. 2018, Circulation research (IF= 15.211). 吉凯产品：过表达腺病毒 研究领域：心肌梗死 浙江大学第二附属医院
7. EphrinB2 Regulates Cardiac Fibrosis Through Modulating the Interaction of Stat3 and TGF-β/Smad3 Signaling. 2017, Circulation Research (IF=13.965). 吉凯产品：RNAi慢病毒和过表达慢病毒 研究领域：心脏纤维化 浙江大学医学院附属第二医院
8. Aldehyde dehydrogenase-2 (ALDH2) opposes hepatocellular carcinoma progression by regulating AMP-activated protein kinase signaling in mice. 2017, Hepatology (IF=13.246). 吉凯产品：过表达慢病毒 研究领域：肝癌 第二军医大学
9. Deficiency of tumor suppressor NDRG2 leads to attention deficit and hyperactive behavior. 2017, The Journal of Clinical Investigation (IF=13.251). 吉凯产品：过表达腺病毒 研究领域：多动症 空军军医大学(第四军医大学)附属西京医院
10. Gephyrin Palmitoylation in Basolateral Amygdala Mediates the Anxiolytic Action of Benzodiazepine. Biological Psychiatry (IF= 11.982). 吉凯产品：过表达AAV 研究领域：焦虑症 华中科技大学同济医学院
11. Gene deficiency and pharmacological inhibition of caspase-1 confers resilience to chronic social defeat stress via regulating the stability of surface AMPARs. Molecular Psychiatry (IF= 11.64). 吉凯产品：过表达AAV 血清型：AAV1 研究领域：抑郁症。华中科技大学同济医学院
12. Long non-coding RNA H19 contributes to apoptosis of hippocampal neurons by inhibiting let-7b in a rat model of temporal lobe epilepsy. Cell Death and Disease (IF=5.638). 吉凯产品：干扰和过表达AAV 血清型：AAV9 研究领域：颞叶癫痫 首都医科大学
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