RNA干扰(RNA interference, RNAi),是指由小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)所介导的转录后基因沉默现象(下图)。双链RNA(double strand RNA, dsRNA)与RNAi核酸酶Dicer结合后,被切割成21~23nt的siRNA,再被输送到RNA诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC),并引导RISC与同源性mRNA结合。核酸酶在siRNA反义链与mRNA所形成的双链区的中央区域切断并降解mRNA,导致靶基因的转录后沉默。
RNAi 可特异性的抑制靶基因表达,不仅能灵活组合同时抑制多个靶基因,还可用于大规模的基因筛选,已被广泛用于基因功能研究和基因治疗领域。
RNAi原理
RNA干扰和CRISPR/Cas9的比较
RNA干扰和CRISPR/Cas9 基因敲除都是下调基因表达的操作方法。那么,这两种方法如何选择呢?首先,我们需要先了解它们的区别。
RNA干扰是从mRNA水平对目的基因进行敲减,而CAS9是从基因组水平对基因进行敲除,可完全消除目的基因在细胞内的表达,靶蛋白的功能也因此完全丧失。此外,CAS9靶点选择范围可以扩大到所有基因组序列,如启动子、内含子等等都可以被剪切。
对比 | RNAi | CRISPR/Cas9基因敲除 |
作用水平 | mRNA水平 | 基因组水平 |
靶位点范围 | 仅转录本 | 所有基因组序列,如外显子、内含子、启动子、增强子、基因间序列等 |
靶蛋白消除水平 | 不完全消除 | 完全消除 |
靶蛋白功能 | 部分丧失 | 完全丧失 |
RNAi与CRISPR/Cas9 基因敲除的比较
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产品类别 | 产品名称 | 简介 | 产品规格 |
质粒 | RNAi-Eeay- shRNA质粒 |
用于下调编码基因/IncRNA, 提供3个干扰靶点序列, 确保其中1个有效 |
10ug (含等量对照) |
RNAi-定制-shRNA质粒 |
用于下调编码基因/IncRNA, 需提供靶点序列 |
10ug (含等量对照) | |
慢病毒 | RNAi-有效靶点-慢病毒( 现货) |
用于下调编码基因/IncRNA, 提供1个干扰靶点序列, 确保293细胞50%干扰效率 |
1E+8TU (含等量对照) |
RNAi-定制-慢病毒 |
用于下调编码基因/IncRNA, 需提供靶点序列 |
1E+8TU (含等量对照) | |
RNAi-定制-慢病毒( Tet-on ) | Tet on诱导干扰慢病毒 | 1E+8TU (含等量对照) | |
RNAi-Eeay-慢病毒 |
用于下调编码基因/IncRNA, 提供3个干扰靶点序列, 确保其中1个有效 |
1E+8TU (含等量对照) | |
腺病毒 | RNAi-定制-腺病毒 |
用于下调编码基因/IncRNA, 需提供靶点序列 |
2E+10PFU (含等量对照) |
RNAi-Eeay-腺病毒 |
用于下调编码基因/IncRNA, 提供3个干扰靶点序列, 确保其中1个有效 |
2E+10PFU (含等量对照) | |
腺相关病毒AAV | RNAi-定制-腺相关病毒 |
用于下调编码基因/IncRNA, 需提供靶点序列 |
1E+12v.g (含等量对照) |
RNAi-外源筛靶-腺相关病毒 |
用于下调编码基因, 预设计3个干扰靶点序列, 在293细胞中筛选, 提供其中1个有效靶点 |
1E+12v.g (含等量对照) |
吉凯提供用于干扰编码基因和非编码基因的质粒、慢病毒、腺病毒和腺相关病毒等多种载体。点击查看载体图谱 >>
调控方式 | 载体编号 | 元件顺序 |
质粒干扰 | GV102 | hU6-MCS-CMV-GFP- SV40-Neomycin |
慢病毒 | GV112 | hU6-MCS -CMV- Puromycin |
GV115 | hU6-MCS-CMV-EGFP | |
GV248 | hU6-MCS-Ubiquitin-EGFP-IRES-puromycin | |
GV298 | U6-MCS-Ubiquitin-Cherry-IRES-puromycin | |
GV493 | hU6-MCS-CBh-gcGFP-IRES-puromycin | |
GV307 | TetllP-TurboRFP-MCS(MIR30)-Ubi-TetR- -IRES-Puromycin | |
腺病毒干扰 | GV119 | hU6-MCS-CMV-EGFP |
AAV干扰 | GV478 | U6-MCS-CAG-EGFP |
GV480 | U6-MCS-CAG-mCherry |
6. Melatonin-mediated inhibition of Cav3.2 T-type Ca2+ channels induces sensory neuronal hypoexcitability through the novel protein kinase C-eta isoform. 2018, Journal of Pineal Research (IF= 11.613). 吉凯产品:干扰腺病毒 研究领域:神经 苏州大学
7. Hippocampal PPARα is a novel therapeutic target for depression and mediates the antidepressant actions of fluoxetine in mice. British journal of pharmacology (IF= 6.81). 吉凯产品:干扰AAV 研究领域:抑郁症 南通大学药学院