腺病毒与其他病毒工具比较,具有以下优势:
a. 是研究原代非增殖细胞基因表达的最佳系统:腺病毒感染细胞后,1-2 天即可表达,是研究原代非增殖细胞基因表达的最佳系统;
b. 滴度高:腺病毒系统在转有 E1 基因的 HEK293 细胞中可进行自我复制,可产生滴度为1010 到1011PFU/mL 的病毒;
c. 载体容量大: 可容纳不超过5kb 的片段;d. 不整合到染色体中,无插入致突变性:腺病毒除卵细胞以外,几乎在所有已知细胞中都不整合到染色体中,因此避免了因整合而引发的潜在的基因突变和随机效应 。
病毒表达系统 |
腺病毒 (Adenovirus) |
慢病毒 (Lentivirus) |
腺相关病毒 (Adeno-As sociate virus) |
病毒基因组 | 双链DNA病毒 | RNA病毒 | 单链DNA病毒 |
复制 | 条件复制 | 不可复制 | 条件复制 |
滴度 | 最高可达1012pfu/ml | 最高可达109TU/ml | 最高可达1012-13v.g/ml |
感染细胞类型 | 感染分裂和不分裂细胞 | 感染分裂和不分裂细胞 | 感染分裂不旺盛的细胞 |
表达丰度 | 高水平表达 | 中到高水平表达 | 高水平表达 |
表达时间 | 快(1-2天) | 慢(2-4天) | 1-2周 |
持续表达时间 |
病毒基因组游离于宿主基因组外, 瞬时表达外源基因 |
病毒基因组整台于宿主基因组, 长时间、稳定表达外源基因 |
病毒基因组游离于宿主基因组外, 在分裂旺盛的细胞中可长时间表达 |
克隆容量 | 适合表达小于5kb的外源片段 | 适合表达小于4kb的外源片段 | 适合表达小于2.8kb的外源片段 |
免疫原性 | 较高免疫原性 | 低免疫原性 | 低免疫原性 |
安全性 | 可能会引起一些咳嗽流涕 |
暂无发现致病性, 已被用于CAR-T治疗作用于人体 |
暂无发现致病性, 已通过欧盟和FDA许可, 用作基因治疗药物的载体 |
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科研-细胞级 | 科研-动物级 |
产品特点 | 可快速获得的纯病毒 |
纯度和滴度较高,滴度达1E+10PFU/m以上, 可用于动物实验 |
适用范围 | 适用于永生化细胞系,或作为病毒扩增毒种 |
适用于在难以转染的细胞中表达特定基因, 也可用于动物实验 |
质量标准 |
滴度≥1E+9 PFU/ml 微生物检测阴性 |
滴度≥1E+10 PFU/ml 复制性腺病毒水平<1 RCA/3.0×10^10VP 病毒感染滴度/病毒颗粒数(IUVP) > 3.3% 质粒DNA残留≤4E+8 copy/ml 宿主DNA残留≤10 μg/ml 微生物检测阴性 |
吉凯提供完善的腺病毒产品体系,用于操作编码基因和非编码基因,如lncRNA、microRNA、circRNA。以下腺病毒载体可供您选择,点击查看载体图谱>>
调控方式 | 载体编号 | 元件顺序 | 原核抗性 | 真核抗性 |
荧光标记 启动子 |
RNAi/过表达 启动子 |
荧光标记 |
过表达 | GV345 | CMV-MCS-3FLAG-SV40-Cherry | Ampicillin | 无 | SV40 | CMV | Cherry |
GV314 | CMV-MCS-3FLAG-SV40-EGFP | Ampicillin | 无 | SV40 | CMV | GFP | |
干扰 | GV119 | hU6-MCS-CMV-EGFP | Ampicillin | 无 | CMV | U6 | GFP |
miRNA-up | GV202 | hU6-MCS-CMV-EGFP | Ampicillin | 无 | CMV | U6 | GFP |
GV317 | CMV-MCS-SV40-EGFP | Ampicillin | 无 | SV40 | CMV | GFP | |
miRNA-down | GV201 | hU6-MCS-CMV-EGFP | Ampicillin | 无 | CMV | U6 | GFP |
腺病毒可有效感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。
代表文献 吉凯客户文章Brain Behavior and Immunity,2017.
文献来源:The long non-coding RNA Neat1 is an important mediator of the therapeutic effect of bexarotene on traumatic brain injury in mice.
2.2 心脏
代表文献 吉凯客户文章 Cardiovascular research, 2014, 102(1): 46-55.
文献来源:Silencing of Pellino1 improves postinfarct cardiac dysfunction and attenuates left ventricular remodeling in mice.
2.3 肝脏
代表文献 吉凯客户文章Laboratory lnvestigation,2017,97(9):1020
文献来源:Paired related homeobox protein 1 regulates PDGF-induced chemotaxis of hepatic stellate cells in liver fibrosis.
代表文献 European Respiratory Joumal,2010,36(4):907-914.
文献来源:Overexpression of transforming growth factor-β1 in fetal monkey lung results in prenatal pulmonary fibrosis.
2.5 胰腺
代表文献 Molecular Therapy ,2011,19(1):60-66.