服务介绍

在体外培养的单层细胞上,划痕致伤,然后以低浓度血清(0.5%)培养基培养,检测细胞一定时间后划痕愈合情况,从而反映细胞转移能力。

技术原理

上皮细胞、癌细胞、角质细胞在生理状态下,形成单层或者复层上皮,当病理状态下,比如创伤愈合,细胞迁移的时候,以侧向运动为主,划痕实验很好的模拟了这种运动形式。细胞划痕是测定肿瘤细胞的运动特性的方法之一,借鉴体外细胞致伤愈合实验模型,在体外培养的单层细胞上,划痕致伤,然后通过药物或者干扰手段观察肿瘤细胞的迁移能力。

吉凯基因提供的划痕实验,还可在HCS仪器中进行(比如Cellomics仪器),通过一次划痕实验,检测几组甚至几十组经不同条件处理的细胞划痕愈伤能力是否有差异,从而筛选出阳性实验组。

结果展示



针对目的基因的shRNA靶点病毒及对照病毒感染NOZ细胞,三天后收集细胞并接种至96孔板中,次日待细胞贴壁后用划痕器均匀划伤,用PBS洗尽划痕时残余细胞,以低浓度血清(0.5%)培养基培养,检测细胞24小时后划痕愈合情况,结果显示, 划痕24h后,shCtrl组NOZ细胞平均迁移面积(像素面积)明显大于shGene组细胞,表明目的基因与NOZ细胞转移相关。

参考文献

1.Lee SJ. et al. Role of the p38 MAPK signaling pathway in mediating interleukin-28A-induced migration of UMUC-3 cells. Int J Mol Med. 2012 Oct;30(4):945-52.


2.Chen LM. et al. Thrombomodulin mediates the progression of epithelial ovarian cancer cells. Tumour Biol. 2013 Dec;34(6):3743-51.5/ 5.


3.Arsic, N. et al. A Novel Function for Cyclin A2: Control of Cell Invasion Via Rhoa Signaling. J. Cell Biol. 196, 147-162 (2012).


4.Espada J1, Matabuena M. et al. Cryptomphalus aspersa mollusc eggs extract promotes migration and prevents cutaneous ageing in keratinocytes and dermal fibroblasts in vitro. Int J Cosmet Sci. 2015 Feb;37(1):41-55.

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