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质粒

质粒是使用广泛的基因操作工具,可以进行编码基因、microRNA、lncRNA的功能研究、启动子活性、转录因子及3’UTR调控研究等。

优势

1.  瞬时表达,导入细胞后约24 小时就可以观察到目的基因的表达;
2.  构建技术简单,因而成本也比较低。

质粒 慢病毒 腺病毒 腺相关病毒
外源基因表达时间 24h开始表达
持续3-7天
2-4天开始表达
长时间稳定表达
1-2天开始表达
持续7-14天
7-14开始表达
细胞分裂不旺盛部位可长时间表达
插入片段大小 < 5-8kb < 4kb < 5-8kb <2.8kb (包括必须的启动
子以及荧光或者标签元件)
稳定细胞株筛选 可以,但较难操作 可以,外源基因整合于
主基因组,筛选简单
不可以,瞬时表达外源
基因传代后效果减弱
不可以
细胞实验 细胞系,部分细胞
转染效率较低
首选,广谱,感染效率高 广谱,感染效率高,
适合原代非增殖细胞感染
不适合细胞实验
动物实验 不适合 适合,根据观察时间
和注射部位选择
较适合(免疫原性高),
根据观察时间和注射部位选择
首选,根据观察时间和注射部位选择
滴度 最高可达109TU/ml 高达1012pfu/ml 高达1012-13v.g/ml

质量标准

吉凯采用高纯度转染级试剂盒进行抽提,按照ISO9001标准进行严格的质量控制,提供最高标准的质粒给客户。


科研-细胞级 科研-动物级
产品特点 纯度优于1次CsCI超速离心纯化的质粒 纯度优于2次CsCI超速离心纯化的质粒
适用范围 适用于永生化细胞系的转染试验、特殊的修饰反应
BAC或者cosmid建库等试验
基因治疗、细胞显微注射、DNA疫苗、基因沉默
( RNAi)等要求严格的操作,以及转染原代细胞、
敏感细胞、悬浮细胞等对内毒素特别敏感的细胞株
质量标准 内毒素< 50EU/ml,超螺旋比例> 90%,
纯度(OD260/280) =1.8-2.0,浓度> 200ng/ul
内毒素< 10EU/ml,超螺旋比例> 90%,
纯度(OD260/280) =1.8~2.0,浓度> 500ng/ul

载体选择

吉凯提供完善的慢质粒产品体系,用于操作编码基因和非编码基因,如lncRNA、microRNA、circRNA。以下慢病毒载体可供您选择。点击查看载体图谱 >>

调控方式 载体 元件顺序 大小bp 原核抗性 真核抗性
过表达 GV609 MCS -firefly_ Luciferase 4994 Ampicillin
GV608 MCS -firfly_ Luciferase 4994 Ampicillin
GV486 CMV-left circular frame-<br>MCS-right circular frame-EF1a-<br>copGFP- SV40-Neomycin 6275 Kanamycin Neomycin
GV485 CMV-left circular frame-<br>MCS-right circular frame-<br>SV40-neomycin 6349 Ampicillin Neomycin
GV272 SV40-firefly_ Luciferase-MCS 5010 Ampicillin
GV238 MCS -firefly_ Luciferase 4994 Ampicillin
GV230 CMV-MCS-EGFP-<br>SV40-Neomycin 4733 Kanamycin Neomycin
GV219 CMV -MCS- SV40-Neomycin 5427 Ampicillin Neomycin
GV146 CMV-MCS-IRES-EGFP-<br>SV40-Neomycin 5308 Kanamycin Neomycin
GV141 CMV-MCS-3FLAG-<br>SV40-Neomycin 5508 Ampicillin Neomycin
RNAi GV102 hU6-MCS-CMV-GFP-SV40-Neomycin 6380 Ampicillin Neomycin
microRNA-down GV249 hU6- MCS-CMV-GFP-SV40-Neomycin 6380 Ampicillin Neomycin
microRNA-up GV268 CMV -MCS-SV40-Neomycin 5427 Ampicillin Neomycin
GV251 hU6-MCS -CMV-GFP-SV40-Neomycin 6380 Ampicillin Neomycin


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引用文献

1. Identification of genomic alterations in oesophageal squamous cell cancer. 2014, Nature (IF= 41.577). 吉凯产品:过表达质粒 研究领域:食管鳞状细胞癌  中国医学科学院

2. The Primate-Specific Gene TMEM14B Marks Outer Radial Glia Cells and Promotes Cortical Expansion and Folding. 2017, Cell stem cell (IF= 23.29). 凯产品:过表达质粒 研究领域:神经  中科院生物物理所

3. Reciprocal Activation between PLK1 and Stat3 Contributes to Survival and Proliferation of Esophageal Cancer Cells. 2011, Gastroenterology (IF=20.773). 吉凯产品:siRNA合成,RNAi质粒 研究领域:食管癌  中国医学科学院

4. Nuclear AURKA acquires kinase-independent transactivating function to enhance breast cancer stem cell phenotype. 2016, Nature Communications (IF=12.353). 吉凯产品:过表达质粒 研究领域:乳腺癌   中山大学

5. A novel autophagy/mitophagy inhibitor liensinine sensitizes breast cancer cells to chemotherapy through DNM1L-mediated mitochondrial fission. 2015, Autophagy (IF= 11.1). 吉凯产品:质粒 研究领域:乳腺癌  第三军医大学

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