EMT分子marker检测

通过Western Blot的方法检测细胞中EMT marker蛋白表达量,判断EMT过程的变化,从而反映细胞转移能力和侵袭能力变化

技术原理

上皮细胞-间充质转化(EMT),是指上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程。在胚胎发育、慢性炎症、组织重建、癌症转移和多种纤维化疾病中发挥了重要作用,其主要的特征有细胞黏附分子(如E-钙黏蛋白)表达的减少、细胞角蛋白细胞骨架转化为波形蛋白(Vimentin)为主的细胞骨架及形态上具有间充质细胞的特征等。通过EMT,上皮细胞失去了细胞极性,失去与基底膜的连接等上皮表型,获得了较高的迁移与侵袭、抗凋亡和降解细胞外基质的能力等间质表型。EMT是上皮细胞来源的恶性肿瘤细胞获得迁移和侵袭能力的重要生物学过程。

通过Western Blot的方法检测细胞中目的基因敲减或过表达后EMT marker蛋白表达量,可判断目的基因表达变化后是否能抑制EMT过程的发生,从而判断该基因是否为转移相关基因。

结果展示


用待研基因shRNA慢病毒感染NOZ细胞,5天后收集细胞进行EMT marker蛋白Western Blot检测,结果显示,shRNA下调目的基因表达后,NOZ细胞EMT过程受到抑制,表明待研基因与NOZ细胞转移相关。

参考文献

Kapur N, et al. CCR6 expression in colon cancer is associated with advanced disease and supports epithelial-to-mesenchymal transition. Br J Cancer. 2016 Jun 14;114(12):1343-51.

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