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划痕愈合实验

在体外培养的单层细胞上,划痕致伤,然后以低浓度血清(0.5%)培养基培养,检测细胞一定时间后划痕愈合情况,从而反映细胞转移能力

技术原理

上皮细胞,癌细胞,角质细胞,在生理状态下,形成单层或者复层上皮,当病理状态下,比如创伤愈合,细胞迁移的时候,以侧向运动为主,划痕实验很好的模拟了这种运动形式。细胞划痕是测定肿瘤细胞的运动特性的方法之一,借鉴体外细胞致伤愈合实验模型,在体外培养的单层细胞上,划痕致伤,然后通过药物或者干扰手段观察肿瘤细胞的迁移能力。

吉凯基因提供的划痕实验,还可在HCS仪器中进行(比如Cellomics仪器),通过一次划痕实验,检测几组、甚至几十组经不同条件处理的细胞划痕愈伤能力是否有差异,从而筛选出阳性实验组。

结果展示


针对目的基因的shRNA靶点病毒及对照病毒感染NOZ细胞,三天后收集细胞并接种至96孔板中,次日待细胞贴壁后用划痕器均匀划伤,用PBS洗尽划痕时残余细胞,以低浓度血清(0.5%)培养基培养,检测细胞24小时后划痕愈合情况,结果显示, 划痕24h后,shCtrl组NOZ细胞平均迁移面积(像素面积)明显大于shGene组细胞,表明目的基因与NOZ细胞转移相关。

参考文献

1.Lee SJ. et al. Role of the p38 MAPK signaling pathway in mediating interleukin-28A-induced migration of UMUC-3 cells. Int J Mol Med. 2012 Oct;30(4):945-52.

2.Chen LM. et al. Thrombomodulin mediates the progression of epithelial ovarian cancer cells. Tumour Biol. 2013 Dec;34(6):3743-51.5/ 5.

3.Arsic, N. et al. A Novel Function for Cyclin A2: Control of Cell Invasion Via Rhoa Signaling. J. Cell Biol. 196, 147-162 (2012).

4.Espada J1, Matabuena M. et al. Cryptomphalus aspersa mollusc eggs extract promotes migration and prevents cutaneous ageing in keratinocytes and dermal fibroblasts in vitro. Int J Cosmet Sci. 2015 Feb;37(1):41-55.

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